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器具如何清潔?

RNA萃取過程中,會面臨的最大的敵人就是RNase,RNase是一個(gè)非常頑強(qiáng)的RNA分解酶,它幾乎無所不在,在我們所處的環(huán)境中、身體表面甚至細(xì)胞內(nèi)就有內(nèi)源性的RNase存在。RNase展現(xiàn)活性時(shí)不需要輔酶(coenzyme)或輔因子(cofactor),在變性溶液的環(huán)境下雖然會失去活性,但是當(dāng)去除變性物質(zhì)后,仍然會展現(xiàn)些許活性,甚至在低濃度的SDS溶液中仍具有活性,因此能做到有效杜絕去除RNase的污染則RNA的萃取就成功了一半了。因此在操作前的首要工作就是,將所有器械置于180℃的高溫下干烤6小時(shí)或更長時(shí)間;或者以 3% H2O2 浸泡30 分鐘以上,再以滅過菌的DEPC水沖洗干凈后,用鋁箔包覆滅菌后使用。在操做萃取時(shí)必須于清潔、無粉塵飛揚(yáng)的環(huán)境,如果環(huán)境允許的話,最好在生物柜或化學(xué)柜中操作。

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