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西亞試劑 —— 品質(zhì)可靠,值得信賴
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除了傳統(tǒng)的純化方法,如 LiCl 沉淀等外,因應(yīng)RNA研究的龐大需求,目前市面上已有許多琳瑯滿目的RNA萃取套組,供給不同萃取需求目的之研究,而這些產(chǎn)品的設(shè)計(jì)原理不外乎是利用有機(jī)溶劑進(jìn)行分層萃取如:(1)phenol-chloroform;或利用RNA于酒精中呈現(xiàn)疏水性的特性,進(jìn)行吸附分離如:(2)吸附性管柱 (Silica column)。一般而言,只要有正確的RNA操作觀念配合正確的步驟,大致上都可以萃取出質(zhì)量不錯(cuò)的RNA,但是不同的萃取方法所取得的RNA組成分布會(huì)有所不同,因此建議要根據(jù)所要分析的對(duì)象RNA,選擇正確的萃取方法或套組,例如:如果要研究小RNA的表現(xiàn)就不可選擇以mRNA為萃取對(duì)象的方法。此外,內(nèi)源核醣核酸分解酶(RNase)含量高的樣品,建議使用含phenol-chloroform的裂解液,以增加去除酶活性的能力。以下我就以TRIzol的操作步驟為例,來(lái)跟讀者分享RNA萃取步驟中應(yīng)注意事項(xiàng)及改善萃取RNA值與量的方法