西亞試劑：：識(shí)別同一物種的性別差異

識(shí)別同一物種的性別差異
蝦、蟹的性染色體沒有統(tǒng)一的模式，用常規(guī)核型分析方法不能鑒別性染色體。通過(guò)RAPD技術(shù)可找出同一物種不同性別的基因組DNA特征性條帶，從而有助于研究性別控制機(jī)制，也可為性別確定提供分子依據(jù)。邱濤用RAPD技術(shù)識(shí)別中華絨螯蟹的性別，200個(gè)引物中有17個(gè)引物擴(kuò)增出群體水平的差異，其中一個(gè)引物(OPM14)擴(kuò)增出個(gè)體水平的差異：雄性有一個(gè)800bP的特異帶，而雌性沒有。這可作為有價(jià)值的性別鑒別標(biāo)記。
2.5監(jiān)測(cè)遺傳滲入，維持物種遺傳多樣性
目前，人為的養(yǎng)殖活動(dòng)、人工放流等使得蝦、蟹類種內(nèi)不同種群間非自然的遺傳滲入已相當(dāng)普遍，應(yīng)引起重視，需加以監(jiān)測(cè)并收集數(shù)據(jù)，為保護(hù)種質(zhì)資源、維持物種遺傳多樣性提供依據(jù)。李思發(fā)等用RAPD指紋標(biāo)記研究中國(guó)大陸六水系絨整蟹的親緣關(guān)系，引物OPP17擴(kuò)增的947bP片段的出現(xiàn)頻率，在長(zhǎng)江、黃河、遼河三群體中顯著地從南到北遞減，長(zhǎng)江蟹87.5%、黃河蟹41.66%、遼河蟹10.83%。這一遺傳滲入的度量可作為區(qū)別三水系中華絨螯蟹的判據(jù)。邱濤等用RAPD方法研究中華絨螯蟹長(zhǎng)江、遼河、甌江水系三群體的遺傳多樣性，并未發(fā)現(xiàn)三群體間存在特征性條帶，但群體間差異大于群體內(nèi)差異。未發(fā)現(xiàn)群體間的分子遺傳標(biāo)記，但三群體間確實(shí)存在差異，表明近來(lái)種質(zhì)資源混雜，遺傳滲入是其中原因之一。
RAPD標(biāo)記可用于群體遺傳學(xué)研究，檢測(cè)種群內(nèi)、種群間的遺傳多樣性水平，并為種群識(shí)別提供可靠的遺傳標(biāo)記。Bardakci等用RAPD技術(shù)評(píng)估了羅非魚的種群內(nèi)、種群間的遺傳變異度。Bielawski等進(jìn)行了太平洋海岸條斑鱸的RAPD分析。Caccone等對(duì)歐洲尖吻鱸的DNA多態(tài)性進(jìn)行RAPD—PCR分析。Garcia等嘗試在斑節(jié)對(duì)蝦中用RAPD分析不同地理群體間的遺傳多態(tài)性，并就其在蝦類選育中的應(yīng)用作了初步探討。王繞梅等用RAPD技術(shù)檢測(cè)野生鯽魚和四個(gè)金魚代表種的基因組DNA多態(tài)性。張德春用該技術(shù)對(duì)湖北、廣西兩個(gè)鰱魚人工養(yǎng)殖群體進(jìn)行了遺傳多樣性的比較研究，為鏈魚人工繁殖的科學(xué)規(guī)范提供一定的理論依據(jù)。張四明等進(jìn)行了中華鱘隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA及遺傳多樣性研究，結(jié)果顯示中華鱘天然群體核DNA水平的遺傳多樣性較低，從而為中華鱘資源的監(jiān)測(cè)和保護(hù)提供了理論依據(jù)。石拓等用該技術(shù)對(duì)中國(guó)對(duì)蝦朝鮮半島西海岸群體的基因組DNA多態(tài)性進(jìn)行了檢測(cè)，表明該對(duì)蝦群體的遺傳多樣性水平較低。宋林生等對(duì)日本對(duì)蝦野生群體和養(yǎng)殖群體的遺傳結(jié)構(gòu)的RAPD標(biāo)記進(jìn)行了初步的研究，并認(rèn)為將RAPD以及其他分子標(biāo)記技術(shù)用于海洋動(dòng)物的育苗育種中，進(jìn)行標(biāo)記輔助育種，是海洋動(dòng)物增養(yǎng)殖健康發(fā)展的有力保證。
RAPD技術(shù)程序簡(jiǎn)單快捷，且無(wú)需事先確定目的基因的序列，無(wú)種屬特異性，有無(wú)數(shù)的引物可供利用，能產(chǎn)生足夠的多態(tài)性，無(wú)需同位索，可以鑒別物種之間和種群之間的基因組的差異，也可區(qū)分個(gè)體之間的差異。為此，許多從事水產(chǎn)育種工作的科研人員已把RAPD技術(shù)應(yīng)用到水產(chǎn)遺傳育種上，并已取得—定的成果。在海水魚類(如大黃魚等)、海水蝦類的種質(zhì)資源研究中，由于同工酶所揭示的種內(nèi)水平上的遺傳差異水平非常低，而RAPD比同工酶更能指示DNA多態(tài)性，因此RAPD分子標(biāo)記在魚類、蝦類、蟹類種質(zhì)資源遺傳學(xué)研究中有著廣泛的應(yīng)用前景。目前RAPD分析主要應(yīng)用于標(biāo)記鑒定、遺傳作圖、系統(tǒng)發(fā)育和進(jìn)化及親緣關(guān)系的研究、種群的劃分、群體遺傳多樣性研究等。但在實(shí)際應(yīng)用中，RAPD也表現(xiàn)出不足，如顯陽(yáng)性位點(diǎn)，在后代中不能區(qū)別是純合體還是雜合體；穩(wěn)定性較差；高度的變異性等缺點(diǎn)。當(dāng)然有些是可以避免的，解決的方法是對(duì)單鏈引物進(jìn)行篩選，優(yōu)化反應(yīng)條件，但第一個(gè)缺點(diǎn)是無(wú)法避免的。如能把RAPD與其它分子標(biāo)記如RFLP、AFLP和微衛(wèi)星等結(jié)合使用，RAPD仍將會(huì)發(fā)揮更好的用途?？傊?，隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展和更多應(yīng)用，RAPD技術(shù)也將更加完善，應(yīng)用更加廣泛。

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