西亞試劑：：從噬菌體文庫中提取DNA的方法

從cDNA噬菌體文庫中提取DNA的方法

1 取5ml噬菌體溶液放入無菌干凈的小燒杯中，緩緩加入固體NaCl，使其終濃度為1M （0.292g）,充分溶解后冰浴1小時(shí)。

2 4oC下11，000g離心10 min，取上清液于另一個(gè)干凈燒杯中，將PEG6000加入燒杯中使其終濃度為10％（W/V, 約0.5克），磁力棒緩慢攪拌，冰水浴1.5小時(shí)，于4oC，15000rpm離心15min，棄上清。

3 將沉淀溶于300ul TE（pH 8.0），加等體積的酚/氯仿/異戊醇（25：24：1），吸吐混勻。

4 4oC，15000rpm離心15min，取上清液

5 在剩下的酚氯仿異戊醇的溶液中再加入200ul的TE，吸吐混勻

6 4oC，15000rpm離心15min，取上清液

7 將由4和6獲得的上清液混合，加等體積的氯仿，吸吐混勻后，4oC， 15000 rpm離心15min

8 加入1/10體積的3M NaAc（pH 5.2）和2.5倍體積的無水乙醇吸吐混勻后至于－80oC30 min以上，于4oC，15000 rpm 離心15min，棄上清。

9 沉淀用70％乙醇洗2－3次，最后一次在4oC，15000 rpm 離心5min。

10 用冰乙醇洗1－2次除去水份。

11 沉淀烘干后加入200 ul TE，測定DNA濃度，－20oC保存?zhèn)溆?/p>