西亞試劑：：瓊脂糖凝膠回收試劑盒

品牌：Qiagen
回收范圍：70bp-4kb
價格：（50包裝1,485，約29元/反應(yīng)）

特點：

• 洗滌體積只要10ul，回收產(chǎn)物濃度高，方便后繼實驗
• 使用方便快捷（wash-and-spin)
• 高回收率
• 回收產(chǎn)物純度高，可用于同位素或熒光測序、芯片分析、連接轉(zhuǎn)化、酶切、標(biāo)記、PCR、顯微注射、體外轉(zhuǎn)錄等后繼實驗

使用心得：

    如果要回收片斷量本來就很少，比如只有幾十個ng，用常規(guī)的試劑盒洗脫得到將近50ul的產(chǎn)物，連接反應(yīng)就很難做——要不體積很大，要不會覺得濃度太低。如果是用來做顯微注射、標(biāo)記等實驗就更難受，只能再濃縮一次，不但麻煩，多一次操作也會導(dǎo)致產(chǎn)物進(jìn)一步的損耗。這一點，就是快速的柱回收試劑盒比傳統(tǒng)方法不如的地方，因為傳統(tǒng)方法得到沉淀后可以按照需要溶解得到自己需要的濃度，柱回收就不行。MinElute就是為這個需要而誕生的。MinElute膠回收試劑盒是基于一種特殊的Silica gel menbrane的膜技術(shù)，能在高鹽濃度的條件下迅速吸附DNA，在低鹽或者純水條件下釋放DNA，只要短短幾分鐘，就能徹底除去包括引物、核苷酸、酶、礦物油、鹽、瓊脂糖、EB以及其它雜質(zhì)，和以前QIAGEN的Silica gel menbrane有所不同的是，它要求的洗脫體積非常小，只要10ul（當(dāng)然這更要注意讓洗脫液加在膜上），純化的DNA是高度濃縮的，回收率在80%以上。這樣就非常適合用于后繼實驗操作，不需要再濃縮一次。

    MinElute為了確保高質(zhì)量和高回收率，利用了特殊的binding buffer，這種緩沖液是特別設(shè)計和優(yōu)化了的，可以增加DNA分子特異性吸收，減少雜質(zhì)，不過也帶來了一個問題，那就是導(dǎo)致MinElute的DNA吸附范圍是70bp到4kb，而不是以往的10kb，因此4kb以上的只能用Qiagen的Qiaquick或其它產(chǎn)品了，而10kb以上就該用QIAEX II系列。此外MinElute柱子的載量是5ug，畢竟洗脫體積這么小。

    體積小則小矣，可是質(zhì)量并不含糊，回收的產(chǎn)物可以用于PCR、克隆、標(biāo)記、測序、體外轉(zhuǎn)錄等后繼實驗，也同樣可以用于顯微注射、芯片分析等要求非常嚴(yán)格的實驗。你盡管可以說，我又不需要做那些嚴(yán)格實驗，我就克隆PCR什么的就夠了，哪兒要那么純——然而你也不能否認(rèn)這本來就是一種質(zhì)量可靠的信心保證。

    除了以上幾個方面，MinElute系列產(chǎn)品正如Qiagen其它產(chǎn)品一樣：講究精確完美，注重細(xì)節(jié)品質(zhì)。MinElute有三種上樣Buffer染料顏色（青、藍(lán)和黃），方便樣品分析，并且也包含pH目測指示染料，可以在溶膠的時候幫助指示實驗錯誤（pH值對膠回收影響較大，見下）——錯誤的顏色代表了凝膠Buffer重復(fù)使用等實驗配置不當(dāng)導(dǎo)致的不正確化合物，這種情況可通過醋酸鈉進(jìn)行調(diào)整。

丙烯醛肉桂醛桂皮醛4-硝基肉桂醛