西亞試劑：：從RNA中提取mRNA的方法(二)

5.mRNA的洗脫

1）為洗脫mRNA，將最終的SA-PMPs重懸于0.1ml的無RNase的水中，溫柔地輕彈離心管以重懸顆粒。

2）65℃水浴2分鐘。

3）用磁場(chǎng)捕獲SA-PMPs，8000rpm離心30秒。

4）將含有洗脫的mRNA的液相移入一無菌的、無RNase的離心管中。勿將顆粒丟棄。

5）重懸SA-PMP顆粒于0.15ml的無RNase的水中，65℃水浴2分鐘，用磁場(chǎng)捕獲SA-PMPs，8000rpm離心2分鐘。將洗脫液與5. 4)步驟中洗脫的mRNA合并。
6）如果這時(shí)有任何顆粒也被攜帶到終溶液中，可用10,000×g，4℃，5-10分鐘的離心來去除。小心地將RNA轉(zhuǎn)入一新鮮的無RNase的離心管中。

6.mRNA的濃縮

1）加入等體積異丙醇，混勻。通常立刻有肉眼可見之沉淀生成，立即以12000rpm離心10分鐘，沉淀mRNA?；蚋鶕?jù)沉淀生成的難易，-20℃放置數(shù)小時(shí)或過夜再沉淀。

2）小心倒去異丙醇，加75%乙醇洗滌。

3）小心倒去75%乙醇，室溫干燥。

4）將mRNA溶于20ul無RNase的水中。注意管壁上通常會(huì)粘附大量mRNA沉淀，用槍頭吸取水滴在管壁上滾動(dòng)數(shù)次以盡可能回收mRNA

丙烯醛肉桂醛桂皮醛4-硝基肉桂醛