西亞試劑：：iPSC無飼養(yǎng)層培養(yǎng)基

2011年，威斯康辛大學(xué)麥迪遜分校Morgridge研究所的Chen等在Nature Methods上發(fā)表文獻(xiàn)稱，在mTeSR1培養(yǎng)體系中去除了β-巰基乙醇后，BSA的存在變得沒有必要。他們進(jìn)一步測試了培養(yǎng)基中其它成分的作用，最后得到了一種只由8種成分組成的hESC/iPSC培養(yǎng)基，并將之命名為E8(Chen et al., 2011)。

E8培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分完全明確的、所含蛋白均為人重組蛋白的無飼養(yǎng)層（feeder-free）培養(yǎng)基。由E8培養(yǎng)基培養(yǎng)得到的hESC/iPSC，具有優(yōu)于血清培養(yǎng)體系下的hESC/iPSC的克隆形態(tài)、多能性干細(xì)胞marker表達(dá)以及向各個胚層分化的能力，與mTeSR1培養(yǎng)得到的hESC/iPSC沒有明顯差別。E8培養(yǎng)基支持hESC和iPSC的feeder-free培養(yǎng)，配合人重組vitronectin基質(zhì)鋪皿，可以得到比在Matrigel上培養(yǎng)更緊密、形態(tài)更規(guī)則的克隆。

據(jù)以往研究結(jié)果，培養(yǎng)基中含有的各個成分都對細(xì)胞具有不止一種作用（多態(tài)性），有些作用可能還不為人們所知，而成分之間以及它們產(chǎn)生的下游信號之間的相互作用產(chǎn)生的影響更為錯綜復(fù)雜。因而僅含有8種成分的E8培養(yǎng)基對細(xì)胞的未知影響更小，較其它培養(yǎng)基在細(xì)胞功能試驗上更具優(yōu)勢。

最后，E8培養(yǎng)基所含的8種成分的生產(chǎn)過程都是可控的，因而不同批次的培養(yǎng)基質(zhì)量一致，經(jīng)測試不同批次的E8培養(yǎng)基培養(yǎng)的得到的ESC/iPSC都具有相同的最佳多能性特征。并且細(xì)胞可以直接從非E8培養(yǎng)體系轉(zhuǎn)入E8培養(yǎng)體系，而不產(chǎn)生適應(yīng)的遲滯期。

在干細(xì)胞研究的臨床推進(jìn)之路上，E8培養(yǎng)基有著得天獨厚的優(yōu)勢，這預(yù)示著由此產(chǎn)生的培養(yǎng)方法，將成為干細(xì)胞培養(yǎng)的主流技術(shù)。具體的優(yōu)勢可以總結(jié)為：化學(xué)成分明確、無動物源成分、支持無飼養(yǎng)層培養(yǎng)；培養(yǎng)得到的hESC/iPSC克隆形態(tài)規(guī)則、緊密、不易分化，多能性marker高表達(dá)，并具有向三胚層分化的能力；簡單的組分減少了對細(xì)胞自身生化過程的影響、避免了對進(jìn)行測試的外部因子和藥物作用的干擾；不同批次的培養(yǎng)基質(zhì)量穩(wěn)定、可重復(fù)性高，是目前最為優(yōu)秀的應(yīng)用于臨床級別hESC/iPSC培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

E8培養(yǎng)基需與其相應(yīng)的試劑組成培養(yǎng)體系，得到最佳的培養(yǎng)效果，例如用人重組vitronectin鋪皿、用無酶的溫和消化液傳代等。商業(yè)化的改良E8培養(yǎng)基及其配合的培養(yǎng)試劑在Cellapy、STEMCELL和Life Technology公司有售賣。

西亞試劑報道