西亞試劑：The Plant Journal：人工miRNA介導(dǎo)基因沉默

北京生命科學(xué)研究所戚益軍博士實驗室在The Plant Journal雜志在線發(fā)表題為“Gene silencing by artificial microRNAs in Chlamydomonas”的文章。該文報道了戚益軍實驗室在衣藻中建立了人工介導(dǎo)基因沉默的技術(shù)。

衣藻是一種單細(xì)胞藻類，它是研究葉綠體，基體和鞭毛的模式生物。2007年4月，戚益軍博士實驗室首先在衣藻中發(fā)現(xiàn)了內(nèi)源的miRNAs，并且證明它可以通過切割靶基因的mRNA來下調(diào)基因的表達(dá)?；谶@一發(fā)現(xiàn)，他們在衣藻中建立了一套利用人工miRNA敲除基因的技術(shù)。他們利用衣藻內(nèi)源表達(dá)的miRNA前體做為骨架，針對MAA7和RBCS1/2兩個基因分別構(gòu)建了人工miRNA（amiRNAs），并在衣藻中成功地表達(dá)了人工miRNA。實驗結(jié)果表明，人工miRNA可以介導(dǎo)相應(yīng)靶基因的切割且切割位點與預(yù)測位點一致，導(dǎo)致MAA7和RBCS1/2這兩個靶基因mRNA積累減少，轉(zhuǎn)基因衣藻表現(xiàn)出相應(yīng)的表型。而后，他們進(jìn)一步構(gòu)建了一個二元的人工miRNA前體，它可以同時產(chǎn)生兩個人工miRNA，并在同一個轉(zhuǎn)基因株中引起兩種相應(yīng)的表型。在衣藻中，人工miRNA技術(shù)的建立對于推進(jìn)衣藻基因功能的研究有著重要的意義，它將在研究單個基因功能和全基因組水平的篩選中得到廣泛應(yīng)用。

趙濤博士是該文章的第一作者，論文的其他作者還有博士研究生王偉和白雪。戚益軍博士為本文的通訊作者。此項研究為科技部863計劃和北京市科委資助課題，在北京生命科學(xué)研究所完成。

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